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重组DNA分子导入受体细胞一、受体细胞的选择依据 1、便于重组DNA分子的导入和筛选克隆子。 2、重组DNA分子在受体细胞中能够稳定维持。 3、适于外源基因的高效表达。 4、遗传性稳定,对于遗传密码没
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第4章4节 重组DNA分析导入受体细胞.ppt
一、插入灭活法。缺点:重组连接效率低 片段方向不定。二、定向克隆发。用两种不同的限制酶同时消化一种特定的DNA分 子。平末端连接策略:。§4. 5 重组DNA分子导入受体细胞。受体细胞(receptor cell)又称宿主细胞或寄主细胞(host cell) 实验技术: 能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞 实验目的: 有应用价值和理论研究价值。可作为受体细胞的原则:。②便于重组DNA分子稳定存在于细胞中 ③便于重组子的筛选 ④遗传稳定性高,易于扩大培养与发酵 ⑤安全性高,无致病性。⑥最好是内源蛋白水解酶缺失或含量低。1. 微生物作为受体细胞。(1)不具纤维素壁 (2)无核膜 (3)基因组简单,便于遗 传分析 (4)单细胞。作为受体细胞的不足:。目前作为受体菌的原核生物有:。(1)大肠杆菌。a.基因组、遗传背景了解最清楚。(2)枯草杆菌 革兰氏阳性菌。a.具胞外酶分泌-调节基因,能将表达产物。(3)蓝细菌 a.光能自养型,易于培养; b.与植物密码子和启动子的通用性, 易于表达植物基因。2. 真菌细胞。酵母菌 a.结构最简单的真核生物, 遗传背景较为清楚 b.蛋白翻译后修饰加工系统 c.不含毒素 d.易培养 e.可分泌。3. 植物细胞。原生质体转化(纤维素酶处理)。4. 动物细胞。常用的动物细胞受体:。小鼠L细胞、Hela细胞、猴肾细胞、中国。动物细胞的优点:。c. 易感染,遗传稳定。缺点: 组织培养技术要求较高,周期长,难度大。二、重组DNA分子转入受体细胞。重组DNA分子进入受体细胞,并在受体细胞内稳。定维持并。

向豆丁求助:有没有重组dna导入真核细胞的方式?

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