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及F7000光度计的使用20120602
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[化学]荧光光谱分析法及F7000光度计的使用20120602
分子荧光分析法
一、基本原理
基态分子吸收了一定能量后,跃迁至激发 态,当激发态分子以辐射跃迁形式将其能量 释放返回基态时,便产生分子发光。 依据激发模式的不同,分子发光分为光致 发光、热致发光、场致发光和化学发光等。 光致发光按激发态的类型又可分为荧光和 磷光两种。 分子荧光分析法是根据物质的分子荧光光 谱进行定性,以荧光强度进行定量的一种分 析方法。
2
一、基本原理
荧光分析法特点: 灵敏度高。检出限通常比分光光度法低2~4 个数量级。 选择性好。 线性范围宽。 应用范围窄。
3
一、基本原理
分子荧光的产生: 在基态时,含有偶数个电子的分子,电子的ms为+1/2 和-1/2, s=0,m=1。则该分子所处的电子能态称为基 态单重态,用符号s0表示 电子被激发且不发生自旋方向的改变。ms为+1/2和-1/ 2, s=0,m=1。则该分子所处的电子能态称为激发单重 态,用符号s表示。 (s1 s2 s3…)
电子被激发且伴随着自旋方向的改变。ms为+1/2和+1/ 2, s=1,m=3。则该分子所处的电子能态称为激发三重 态,用符号t表示。(t1 t2 t3…)
4
一、基本原理
内转换
s
2
振动弛豫 内转换 系间跨越
s1
能 量 吸 收
t1 t2
发 射 荧 光 外转换 发 射 磷 振动弛豫 光
s0 l1 l2 l3 l4
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一、基本原理
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