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MTT实验方法步骤.doc
- 一．悬浮细胞MTT 实验时,由于离心弃上清会造成一定程度的细胞丢失,而且操作又麻烦.请教各位老师,不用弃上清的SDS-DMF,酸化异丙醇的方法的具体步骤和参考文献.谢谢! 1．介绍一种巨噬细胞杀伤活性
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MTT法.doc
- MTT法（四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法）检测细胞增殖曲线，研究对细胞存活的影响：取对数生长期的细胞，经0.25％胰蛋白酶消化，制成单细胞悬液计数，(共36－40ml培养液)调整细胞浓度为5103个细
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MTT法.ppt
- MTTMTT 噻唑兰，简称噻唑兰，简称MTT MTT，可透过细胞膜进入细 ，可透过细胞膜进入细胞内，活细胞线粒体中的琥珀脱氢酶能使 胞内，活细胞线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性 外源性MTT MTT还原
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MTT检测技巧.doc
- 细胞：1¸选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低，太少观察不到差异。2¸药物浓度的设定。一定要多看文献，参考别人的结果再定个比较大的范围先初筛。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记！否则，可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。3¸ 时间点的设定。在不同时间点的测定OD值，输入excel表，最后得到不同时间点的抑制率变化情况，画出变化的曲线，曲线什么时候变得平坦了（到了平台期）那个时间点应该就是最好的时间点（因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显）。4¸培养时间。200ul的培养液对于10的4～5次方的增殖期细胞来说，很难维持68h，如果营养不够的话，细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止，影响结果，我们是在48h换液的。5¸MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数。做MTT时，尽量无菌操作，因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。6¸理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。7¸实验时应设置调零孔，对照孔，加药孔。调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜，不同的是对照孔加溶解药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。8¸避免血清干扰。用含15％胎牛血清培养液培养细胞时，高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加，会试验敏感性。因此，一般选小于10％胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞：1¸收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。2¸5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）,加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，但我们常在前一天下午铺板，次日上午加药¸一般5-7个梯度,每孔100ul,设3-5个复孔¸建议设5个，否则难以反应真实情况3¸5%CO2，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。4¸每孔加入20ulMTT溶液（5m
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MTT风险控制论.doc
- 说句心里话，以前很少在各个论坛上发言，但自从来到这个论坛，发现这里的气氛真的很像二十年前在学校时的那样。（呵呵，我的年纪是大叔辈的了，莫怪我在这里装嫩啊！）虽然素昧平生，但是兄弟们互相帮助，真诚以对，
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MSDS-MTT-9925553.pdf
- yPerson alPr ot ect on210EMaterialSafety Data SheetMTT MSDSSection ChemicalProduct CompanyIdentifica
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MTT User Guide.pdf
- MAGNETICTHICKNESS TOOL User Guide V1.0 November 2003 Copyright SondexWireline Ltd 2003 All Rights Re
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Sigma的MTT说明书.pdf
- ProductInformationMTTProductNo. 5655(3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazoliumbromide; Th
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MTT法小结.ppt
- MTTMTT 检测细胞存活和生长情况 用于评价细胞毒作用 微生物污染可导致本法假阳性结果MTT 配制MTT时用PBS<ph=7.4>溶解,也有人用生理盐水配，60水浴助溶。1. 接种细胞：用0.08%
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SOP of MTT assay.doc
- 细胞培养MTT
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向豆丁求助：有没有mtt?
