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1295.龙须菜活性多糖提取、分离纯化、结构及其活性的研究.doc
- 龙须菜活性多糖提取、
分离纯化、结构及其活性的研究
摘 要
本文首次以免疫活性为筛选指标、用冻溶除胶法分离活性多糖，运用化学和色谱双重分析方法系统深入地研究了龙须菜（Gracilaria lemaneiformis）活性多糖的提取优化、分离纯化以及粗多糖和均一多糖的化学组成、结构和活性。研究结果表明：
1、通过冻溶法得到龙须菜胶体多糖(NGF)和非胶体多糖(SGF)，其中SGF的溶出率和多糖含量均显著高于NGF,但NGF的免疫活性极显著高于SGF(P<0.01)；
2、不同提取水温对龙须菜非胶体粗多糖的得率影响显著(n=24, P<0.01), 50℃水温提取时, 龙须菜非胶体粗多糖的得率最高9.11±0.31%, 蛋白含量最低仅为4.38±0.13%, 当提取水温超过60℃时, 非胶体粗多糖的得率显著下降;龙须菜非胶体粗多糖均表现出显著的体外免疫活性, 其中50℃提取水温组的活性显著高于其它各温度组,各组没有表现出抗HSV-Ⅰ型和Ⅱ型病毒活性; 各组非胶体粗多糖的3,6内醚半乳糖含量在15-20%之间, 而半乳糖的含量则在30-40%之间，其中内醚半乳糖和半乳糖之和占已知总糖的90％以上,50℃提取水温组硫酸基含量略高于其它组。
3、对50℃水温提取条件进行了优化，发现提取次数对溶出率有着较大的影响,提取3次得率最高为13.63％，提取1次仅为7.63％， 但提取次数、料水比和提取时间对非胶体粗多糖的多糖含量、蛋白含量、免疫活性均无显著影响,通过正交实验和结合实际生产能耗因素,确定最佳提取工艺为: 提取水温为50 ℃， 料水比为1:40(质量比), 提取2次, 每次浸提3小时。
4、用离子色谱法对NGF进行分离得到盐相（NGFS）和水相（NGFW）, NGFS的得率、3,6内醚半乳糖和半乳糖含量分别为：51.10±4.10％、27.83±0.23％和62.10±1.88％显著高于水相的0.60±0.13％、17.98±0.23％和29.31±0.34％ (P < 0.01), 水相的多糖种类、多糖含量、蛋白含量和免疫活性要高于盐相; 从得率和纯度两方面考虑选择NG
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