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差异显示聚合酶链反应法筛选人绒毛膜上皮癌与孕早期绒毛组织之间的差异基因.pdf
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猪脑心肌病毒(EMCV)的检测 反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)编制说明.doc
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广西地方标准《PRRSV美洲型经典株、变异株以及欧洲型毒株的检测多重RT-PCR 法》(征求意见稿)编制说明 一、项目背景、来源及目的 1、项目背景 猪蓝耳病,又名猪繁殖与呼吸综合征(Porcine
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聚合酶链反应-直接测序快速检测结核分枝杆菌利福平耐药菌株.pdf
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聚合酶链反应法快速检定深部真菌病致病菌种的实验研究.pdf
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聚合酶链反应法测定幽门螺杆菌的vacA基因型.doc
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检测戊型肝炎病毒核酸的实时荧光聚合酶链反应法的建立.pdf
目的:建立一种能快速、敏感地检测戊型肝炎病毒(HEV)核酸的实时荧光聚合酶链反应法(Real time RT-PCR)。方法:基于HEV ORF3保守区序列,设计26条引物和3条探针,并从中进行筛选,而且对选择出的引物和探针的浓度以及反应体系、反应条件和核酸的抽提方法等进行优化和选择。结果:从26条引物和3条探针中优化出一对引物和探针的组合,优化的30μL反应体系含有10mmol/LTris-HCI(pH9.2),50mmol/LKCl,1.0mmol/LMgCl<,2>,0.175mmol/LdNTPs,上游引物为0.10mmol/L,下游引物为0.10mmol/L,探针为0.20mmol/L,Taq酶的浓度为3U,AMV逆转录酶2U;优化的反应条件为50℃ 30min;95℃ 3min;95℃ 10sec 50℃ 30sec 72℃ 60sec,5个循环,95℃ 10sec 57℃ 40sec,40个循环。初步结果显示具有较好的特异性和敏感性。结论:建立的检测HEV核酸的实时荧光聚合酶链反应法具有简便、快速、灵敏度较高以及不易被污染等优点,具有一定的临床应用潜力。

向豆丁求助:有没有聚合酶链反应法?