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第6章 蛋白质理化性质及分离纯化.ppt
茶学与生物系-生物化学(一)蛋白质的重要性质 第五节 蛋白质的理化性质与分离纯化 1.蛋白质分子的大小 测定方法:1)超速离心法 2)凝胶过滤法 3)聚丙烯酰胺凝胶电泳法 4)化学组成法测定 茶学与生
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蛋白质理化性质分离纯化.ppt
一、蛋白质的两性电离蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外,氨基酸残基侧链中某些基团,在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。*蛋白质的等电点( isoelectric point, p
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生物化学 第7章 蛋白质理化性质及分离纯化.ppt
生物化学 第7章 蛋白质的理化性质及其分离纯化
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[生物学]蛋白质的理化性质及分离分析蛋白质的理化性质 及分离分析

蛋白质的理化性质
一、两性性质及等电点 二、胶体性质 三、变性与复性作用 四、蛋白质的沉淀作用 五、沉降作用 六、蛋白质的颜色反应 七、蛋白质的紫外吸收性质

一、蛋白质的两性解离与等电点
蛋白质分子中氨基酸残基的侧链上存在游离的
氨基和羧基,因此蛋白质与氨基酸一样具有两

性解离性质,具有特定的等电点(pi)。
溶液ph=pi时,蛋白质所带正负电荷相等;

ph>pi时,蛋白质带净负电荷;
ph<pi时,蛋白质带净正电荷。

等离子点:蛋白质在纯水溶液中的带电状态则没有其 他离子干扰,完全由h+的解离和结合来决定,这种条 件下的等电点称为等离子点。等离子点是蛋白质的特 征性常数。

等电点时特点:
(1)净电荷为零 (2)一定离子强度的缓冲液 (3)多数蛋白质在水中等电点偏酸
胃蛋白酶 血红蛋白 细胞色素c 菊糖酶
碱性aa/酸性aa比例 0.2 1.7 2.9 0.34 等电点 1.0 6.7 10.7 8.2

(4)在等电点时蛋白质的导电性、溶解度、黏 度及渗透压都最小。

等电沉淀和蛋白电泳:
迁移率与净电荷量、分子大小、分子形状等有关

电泳( electrophoresis) 带电粒子在电场中移动的现象称为电泳

(electrophoresis) 。

蛋白质分子在一定ph的溶液中可带净的负电 荷或正电荷,故可在电场中发生移动。

不同蛋白质分子所带电荷量不同,且分子大
小也不同,故在电场中的移动速度也不同,

据此可互相分离。

凝胶电泳
聚丙烯酰胺凝胶(蛋白质和多核苷酸) 琼脂糖凝胶(核酸)

单体:丙烯酰胺(acrylamide),甲叉双丙烯酰
胺(n,n´-methylenebisacrylam
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