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蛋白质的理化性质
一、两性性质及等电点 二、胶体性质 三、变性与复性作用 四、蛋白质的沉淀作用 五、沉降作用 六、蛋白质的颜色反应 七、蛋白质的紫外吸收性质
一、蛋白质的两性解离与等电点
蛋白质分子中氨基酸残基的侧链上存在游离的
氨基和羧基,因此蛋白质与氨基酸一样具有两
性解离性质,具有特定的等电点(pi)。
溶液ph=pi时,蛋白质所带正负电荷相等;
ph>pi时,蛋白质带净负电荷;
ph<pi时,蛋白质带净正电荷。
等离子点:蛋白质在纯水溶液中的带电状态则没有其 他离子干扰,完全由h+的解离和结合来决定,这种条 件下的等电点称为等离子点。等离子点是蛋白质的特 征性常数。
等电点时特点:
(1)净电荷为零 (2)一定离子强度的缓冲液 (3)多数蛋白质在水中等电点偏酸
胃蛋白酶 血红蛋白 细胞色素c 菊糖酶
碱性aa/酸性aa比例 0.2 1.7 2.9 0.34 等电点 1.0 6.7 10.7 8.2
(4)在等电点时蛋白质的导电性、溶解度、黏 度及渗透压都最小。
等电沉淀和蛋白电泳:
迁移率与净电荷量、分子大小、分子形状等有关
电泳( electrophoresis) 带电粒子在电场中移动的现象称为电泳
(electrophoresis) 。
蛋白质分子在一定ph的溶液中可带净的负电 荷或正电荷,故可在电场中发生移动。
不同蛋白质分子所带电荷量不同,且分子大
小也不同,故在电场中的移动速度也不同,
据此可互相分离。
凝胶电泳
聚丙烯酰胺凝胶(蛋白质和多核苷酸) 琼脂糖凝胶(核酸)
单体:丙烯酰胺(acrylamide),甲叉双丙烯酰
胺(n,n´-methylenebisacrylam
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