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酿酒酵母新DNA复制起始蛋白的筛选、鉴定及其功能的研究论文作者:王加峰专业名称: 生物化学与分子生物学指导教师: 梁纯教授陆勇军副教授摘要随着对DNA复制起始蛋白及其调控因子研究的不断深入,人们对DN
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酿酒酵母Mia40-Erv1二硫键传递体系底物蛋白及Mia40-Erv1复合体初步晶体学研究Er,研究,酵母,复合体,酿酒酵母,Erv1,Mia40,蛋白质,二硫键,体系及
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学校代号10524 中南民族大学导师姓名及职称 教授,韩晓乐 讲师 抗癌药物的生物效应论文提交日期 2020.05.26 学校代号:10524学 号:2017110215密 级:中南民族大学硕士学位论
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酿酒酵母谷氧还蛋白单巯基家族中Grx5的结构和功能研究.pdf
1.酿酒酵母单巯基谷氧还蛋白家族中Grx5的结构和功能分析
谷氧还蛋白(Grxs)是一类小分子量的蛋白。它们以GSH作为电子供体来
催化还原蛋白质问以及蛋白质和小分子化合物间所形成的二硫键。根据活性位
点中的半胱氨酸的数量,谷氧还蛋白又可以被分为谷氧还蛋白双巯基家族(含
有CPY/FC motifs)和单巯基家族(含有CGFS motif)。相对于双巯基家族来
说,我们对谷氧还蛋白单巯基家族的催化机制还了解较少。单巯基谷氧还蛋白
Grx5作为单巯基家族的代表,是唯一定位于线粒体中的单巯基谷氧还蛋白,并
且在铁硫簇的生物合成中扮演重要角色。在酵母的GRX5缺失株的体内细胞生
物学研究表明,Grx5对于细胞的生长是必须的。通过一级结构序列的比对发现,
Grx5只含有一个Grx结构域。除了在活性区域CGFS有一个保守的半胱氨酸
(Cys60)以外,Grx5在C端仍有一个非保守的半胱氨酸(Cysl 17)。氧化态
Grx5作为反应中间体,它的形成依赖于Cys60和Cysll7之间形成二硫键。为
了从结构生物学的角度阐释Grx5的功能,我们从酵母cDNA中克隆了野生型
的Grx5及其突变体(Cysl 17Ser)的基因序列,克隆和纯化得到了高纯度蛋白。
经过晶体筛选得到粗晶,优化后得到1.67 A高衍射分辨率的野生型晶体和2.60
A的突变体(Grx5 Cysl 17Ser)晶体,同时解析了野生型Grx5还原态的结构。
我们发现,Cys60和Cysll7之间要形成的分子内二硫键使Grx5发生局部的构
象变化,而且从Grx5与GSH的接合位点与Grxl和Grx2存在着差异,因而使
其不具有经典的Crrx活性。
2.酿酒酵母单巯基谷氧还蛋自家族中Grx5的活性研究
Grx5全长有150个氨基酸,我们在分子克隆中去除了N端29个氨基酸的
信号肽。Grx5与其他物种的单巯基谷氧还蛋白显示出很高的序列同源性,并
都具有CGFS活性序列。在酵母的GRX5缺失株的体内细胞生物学研究表明,
GRX5对于细胞的生长是必须的,但它不能使细胞致死。Grx5在经典的t-lED
测定体系中不显示活性,说明氧化态Grx5不可以直接被GSH还原。但是通过
我们建立的活性测定体系,证明氧化态的Grx5可分别被酵母Grx2和Trr2还原
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酿酒酵母Rck2蛋白的结构与功能研究.pdf
酿酒酵母Rck2蛋白的结构与功能研究
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酿酒酵母甘露蛋白是一种有效生物乳化剂.docx
酿酒酵母甘露蛋白是一种有效生物乳化剂2(:尽管从天然来源获取乳化刹的成本一般很高,但在诸多方面均优于化学合成乳化剂.由于对天然产品的消费需求与日俱增,生物乳化剂的成本最终可能变得适合各种用途.已知的酵母生物乳化刹均是用在水不混溶底物,如油或链烷上能生长的酵母生产的.这些冀习:有热带假丝酵母秆解脂假丝酵母等.它们仅诅:有水不混游底物情况下才能生产.看来,是这种底物便于酵母的新陈代谢.生物乳亿剂是一种胞外产物,或是结台在细胞表面的物质,均含糖类和肽.用于分离生物乳化剂的方法已有好几种,如酶消化法,泡沫分离法和氯仿一一甲醇反复提取法等.由于产量低,需要碳氢化台物作底物,且制备方法复杂,而使得已知的几种酵母衍生乳化剂的工业开发近乎不可能..我们这项究的目的是增加酵母衍生乳化封的产量.我们介绍一种用酿酒酵母生产的新乳化荆的简单方法.该乳化刹鉴定为露蛋白,是酵母细胞壁的一种主要成分.我们测定了甘露蛋白的乳化特隍.乳化耕是从不同酵母中提取的,如生产啤酒和果酒的废弃酵母,生产犟细胞蛋白静酵母及不同属的13种酵母.材料和方法化学试锕和.舞所使用的化学试剂均为试剂级.裂解酶26来自实验室´链霉蛋白酶来自?公司矿物油(级70)由赠选,煤油和玉米油从零售店购买.酵母菌株和生长培彝基,新鲜酿稻酵母()从获得.废弃酵母是采用接种工业酵母菌种的小批量啤谣果酒主发酵后沉淀的酵母.其它酵母菌种由加拿大国家研究院菌种收藏所的.提供.产朊但丝酵母0来源-研究中心菌种收藏处.所有酵母株纯培养物用培养基斜面(0.5[/1)酵母膏.1蛋白腺,1%葡萄糖和1.5琼脂)4´保存.各种酵母采用液体培养基.28.旋转式摇床培养2天.从表三可知,从制曲开始添加碳酸钙,曲的直上升过高,纤维索酶活性显着降低,碳酸钙添加时间推迟到制曲后第3~4天,的纤维素酶和木锴甙酶积蓄量显着增加了 ^.而且在该实倒中,不限于碳酸钙,即使使用其它的固体状或溶液状碱性物质,也同样将碱性物质疆如时间推迟刊制曲后第3~4天,效果最好.
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(药物化学专业论文)酿酒酵母Rck2蛋白的结构与功能研究.pdf
(药物化学专业论文)酿酒酵母Rck2蛋白的结构与功能研究作用,论文,专业,药物化学,酿酒酵母,功能研究,结构和,RCK2和,RCK2

向豆丁求助:有没有酿酒酵母类金属硫蛋白生物功能研究?