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冻干手札
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MDCK细胞的冻存和复苏.doc
MDCK细胞的冻存和复苏MDCK细胞的冻存和复苏MDCK细胞的冻存和复苏
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细胞复苏与冻存【医学医药资料】.doc
关于细胞复苏细胞冷冻保存与复苏原理 体外培养的原理和技术. 主编.2001 月.科学出版社,pp128-136 细胞冷冻保存与复苏原理 在低于-700C 的超低温条件下，有机体细胞内部的生化反应极其缓
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细胞冻存、解冻方法与细胞计数.doc
细胞冻存、解冻方法与细胞计数转载请注明来自丁香园发布日期:2006-08-14 11:28 文章来源: HYPERLINK"" 丁香园 HYPERLINK"ht
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细胞冻存步骤.doc
细胞冻存步骤一、所需仪器： -86超低温冰箱 离心机 生物安全柜 电动移液器 CO2培养箱 倒置显微镜 液氮罐 程序降温盒 二、所需试剂： 胎牛血清（FBS） 细胞培养级DMSO 冻存液：80%FBS
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细胞冻存和复苏.doc
细胞低温冷冻贮存是细胞室的常规工作。细胞冻存与细胞传代保存相比可以减少入力、经费，减少污染，减少细胞生物学特性变化。冻存和复苏的原则：慢冻快融 如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；
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细胞复苏与冻存.doc
细胞冻存与复苏原则：慢冻快融 在超低温的液氮中进行冻存(-196 度）。在冻存过程中，随着温度的改变，细胞内部结构讲发生一系列的变化。细胞快速冻存时，将会受到很大的损伤，甚至导致细胞的死亡。温度急速下
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细胞复苏与冻存.doc
细胞复苏与冻存细胞复苏与冻存细胞复苏与冻存
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细胞冻存与复苏.doc
细胞冻存、解冻方法与细胞计数一、细胞冷冻保存 1、材料： 生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO（Sigma D-2650）、无菌塑料冷冻保存管（Nalgene 5000-0020）、0.4％（w/
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细胞冻存 (生物学).doc
细胞冻存 (生物学): 细胞的冻存 细胞深低温保存的基本原理是：在－70℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。 总的原则是缓慢冻存！！！ 一 材料： 生长良好之培养细胞 ，新鲜培养基， DMSO ，无菌塑料冷冻保存管，血球计数盘与盖玻片 。 二步骤： 2.1 冷冻前一日前更换半量或全量培养基，观察细胞生长情形,最好细胞应该处于对数生长期。 2.2. 配制冷冻保存溶液(使用前配制)：将DMSO 加入新鲜培养基中，最后浓度为5-10％，混合均匀，置于室温下待用。 2.3. 依细胞继代培养之操作，收集培养之细胞与冻存管内，取少量细胞悬浮液(约0.1 ml) 计数细胞浓度。 2.4. 先将冻存管放入4℃冰箱，约40min。 2.5 接着置于-20℃冰箱，约30-60min。 2.6. 置于-80超低温冰箱中放置过夜。 2.7. 置于液氮罐中长期保存。 2.8 同时做好冻存记录，在自己的笔记本和冻存记录本上均要记录。 三 注意事项： 3.1.使用DMSO前，不需要进行高压灭菌，它本身就有灭菌的作用。高压灭菌反而会破坏它的分子结构，以至于降低冷冻保护效果。在常温下，DMSO对人体有害，故在配制时最好戴上手套操作。混合DMSO要快，因为DMSO对细胞有毒性，混合之后应尽快冻存，提醒各位注意的是加入冻存液后一定要混匀，防止DMSO沉淀。冻存液比例培养基7：血清2：DMSO1，也有将血清比例加大的做法，有的甚至将血清提高到90%，具体浓度视经验而定，但是好多人认为小牛血清含量越高越好！ 3.2.不宜将冻存细胞放置在0℃～-60℃这一温度范围内过久，低温损伤主要发生在这 一温度区内，是“危险温区”。 可以先在泡沫上打孔，把冻存管塞进去。这样降温可以慢一点，当然包上棉花也是不错的主意 3.3 .注意定期检查液氮罐内液氮量，及时添加。 3.4 -20°C 不可超過 1 小時，以防止冰晶過大而造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟，冷凍管置於厚保麗龍內，直接放入 -80°C 冰箱中，但存活率會降低一些。但是大多数人：4度半小
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细胞冻存与复苏技术.doc
细胞冻存与复苏技术细胞冻存与复苏技术 概述 细胞培养技术自1907 年开创以来，历经一个世纪现已成为自然科学领域不可缺少的研究方法之一。在细胞培养技术广泛用于科学研究领域的令天，细胞株的冷冻保存和解冻
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